一篇关于生物化学的论文

凯尔波罗样激酶1(PLK 1)是一个重要的靶标。由于其所需的功能，抗癌疗法可以分裂细胞，提高癌细胞失活的敏感性。已经出现了几种针对plk1的药物，包括bi-2536和ZK-噻唑烷酮(TAL)。这些抑制剂和阻滞细胞的有丝分裂和表型与下调Plk 1的其他手段bi-2536和药理学优化模拟(bi-6727)一致，这些手段显示了初步临床试验的希望。化学基因系统的抑制能力也得到了发展。在该系统中，PLK 1基因缺失的两个拷贝的永生化人视网膜色素上皮细胞通过定位和cre-lox介导进行重组。在酶Cre介导的切除中，Plk 1 –/–克隆不能被克隆，除非它们补充Plk 1的表达，无论是野生型(plk1wt)还是复合突变(l 130g c67v；；之后plk1as)。通过扩大激酶的活性位点，后一种突变允许Plk 1接受大体积的嘌呤类似物，如三磷酸腺苷竞争抑制剂。我们在此报告，这些突变对脱敏的Plk 1临床有用的抑制剂如bi-2536和TAR也有意想不到的影响。(结构中使用的所有化学品如补充图纸1所示。)

在检查具有抗增殖活性的bi-2536时，我们发现该化合物强烈抑制plk1wt细胞的生长，但对plk1as细胞几乎没有或没有影响(图1，2)。为了确定是否改变抑制剂功效独特的bi-2536，我们使用不同结构的Plk 1抑制剂进行了类似的生长挑战实验环境。第三，我们观察到plk1as细胞与基因plk1wt同行(数字集成电路，开发)有显著差异。为了了解抑制剂耐药性的深度和广度，我们询问了体内的各种读数和活动。PLK 1需要在整个有丝分裂，良好的功能，中心体成熟，双极纺锤体组装，稳定附着的能动微管，并开始细胞质。所有这些程序被证明是针对两种plk1靶向抑制剂的定性和定量。例如，plk1as细胞继续募集存在于双极纺锤体中的γ-微管蛋白(中心体成熟的基本表达)和bi-2536(图2)和Tal(图B)的中心体。同样，过度磷酸化Bubr1(一个关键因素，稳定的活动微管附着)的能力没有受到损害，这反映在BubR 1等多肽的连续流动转移电泳中(图2)。根据这种广泛的缺陷，这两种化合物引起PLK 1G(而不是plk1as细胞)的有丝分裂停滞。看它们的圆形外观和相差显微镜(如图4)。