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丝绸之路的基本走向形成于公元前后的汉代。东起西汉都城长安(今安)，或东汉都城洛阳，经陇西或固原西行至金城(今兰州)，再经河西走廊的武威、张掖、酒泉、敦煌四县，出玉门关或阳关，经白龙堆至罗布泊楼兰。汉代西域分为南路和北路，两路分叉点在楼兰。向北，经曲黎(今库尔勒)、龟兹(今库车)、古墨(今阿克苏)至疏勒(今喀什)。南路起于鄯善(今若羌)，经且末、京觉(今民丰尼雅遗址)、于阗(今和田)、皮山、莎车至疏勒。从疏勒往西，越过丛陵(今帕米尔)到大湾(今费尔干纳)。从这里，我们可以向西到大夏(今阿富汗)、粟特(今乌兹别克斯坦)、安息(今伊朗)，远到大秦(罗马帝国东部)的犁铧(又名李璇，在埃及亚历山大)。另一路自皮山西南，过道口(今巴基斯坦达利尔)，经柯宾(今阿富汗喀布尔)、武夷山(今锡斯坦)，向西南至条支(今波斯湾头)。如果从宾往南到印度口(今巴基斯坦卡拉奇)，还可以通过海路到达波斯和罗马。这是汉武帝时期张骞两次出使西域后形成的丝绸之路基本干线。换句话说，狭义的丝绸之路就是指上述道路。

历史上的丝绸之路不是一成不变的。随着地理环境的变化和政教形势的演变，一些新的道路不断开辟，一些道路发生了变化甚至被废弃。例如，敦煌和罗布泊之间的白龙堆是一个丫蛋地形，经常让旅行者迷失方向。东汉初年蒙古高原上的北匈奴战败，被迫西迁。中原王朝牢牢占据义乌(今哈密)后，开辟了敦煌到义乌的“北方新路”。从义乌经高昌(今吐鲁番)、焉耆至龟兹，与原丝绸之路北路交汇。南北朝时期，中国南北对立，北方东西也和谐。在这样的情况下，南朝、宋、齐、梁、陈与西域的交流，大都是沿长江到益州(今成都)，再向北到龙河(今松潘)，经过青海湖岸边的吐谷浑都城，向西经过柴达木盆地到敦煌，与丝绸之路主干道汇合。或者向西穿过阿尔金山口，进入西域鄯善地区，与丝路南路汇合。这条路被称为“吐谷浑道”或“河南路”，今天人们也称之为“青海路”。又从中原或河西走廊以北到蒙古高原，再向西到天山北麓，跨过伊犁河到碎叶(今托克马克附近)，进入中亚。这条路后来被称为“北新路”，在蒙古汗国和元朝时期非常繁荣。

除了陆上丝绸之路，从汉朝开始，中国人就开通了从广东到印度的水路。宋代以后，随着中国南方的进一步开发和经济重心的南移，从广州、泉州、杭州等地出发的海上航线日益发达，越走越远，从南洋到阿拉伯海，甚至远至非洲东海岸。人们称这些海上贸易路线为“海上丝绸之路”。