NCBI没有的基因序列
提取该物质的总RNA用于逆转录。
获得cDNA后,合成双链。
根据同源物种的基因序列设计引物(简并引物)。
通过PCR扩增目标片段(可以使用巢式PCR来增加特异性)
橡胶切割、回收和净化
质粒载体连接转染
通过筛选获得的重组体的测序
获得基因序列后,根据该序列再次设计引物。
进行3英尺和5英尺赛跑
重新测序证实了全长基因。
拟南芥突变体基因的功能分析
这是我的一个同学做的博士论文实验过程。
我们做的是一个树种的同源克隆。