NCBI没有的基因序列

提取该物质的总RNA用于逆转录。

获得cDNA后,合成双链。

根据同源物种的基因序列设计引物(简并引物)。

通过PCR扩增目标片段(可以使用巢式PCR来增加特异性)

橡胶切割、回收和净化

质粒载体连接转染

通过筛选获得的重组体的测序

获得基因序列后,根据该序列再次设计引物。

进行3英尺和5英尺赛跑

重新测序证实了全长基因。

拟南芥突变体基因的功能分析

这是我的一个同学做的博士论文实验过程。

我们做的是一个树种的同源克隆。