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05级

学生编号

054120150

姓

王瑞

毕业论文题目

梓醇对D-半乳糖诱导的衰老神经元的影响

毕业论文的起止时间

2009年2月至2009年6月

讲师姓名

张秀丽

职称

博士生和讲师

背景介绍:

随着全球中老年人的比例和绝对数量不断增加，人口中与衰老相关的疾病发病率显著增加，与衰老相关的疾病成为科学家面临的重要挑战。由于这类疾病常伴有严重的认知障碍和精神障碍，甚至瘫痪和感觉障碍[1]，严重危害老年人的健康，也给家庭和社会带来沉重的负担。因此，探索大脑衰老的机制，研究延缓衰老过程的有效药物，防治老年病，已成为当今社会和医学界的重要课题。

在众多老年病中，神经退行性疾病的患病率呈逐年上升趋势，已成为影响人们健康水平和生活质量的重大社会问题。神经退行性疾病，如阿尔茨海默病(阿尔茨海默病)、帕金森病、肌萎缩侧索硬化和亨廷顿舞蹈病等，是一类中枢神经系统异常变性引起的进行性性功能障碍和衰退性疾病。其中，老年期痴呆患病率占老年人口的4.6%，其中半数为老年原发性退行性痴呆。流行病学调查还显示，65岁以上人群中，老年原发性退行性痴呆的发病率为2.9%。该病具有复杂的病理生理过程，受基因调控和各种环境因素的影响，其病因和发病机制尚不清楚。临床上没有有效的措施控制这类疾病的进展，患者最终会丧失生活能力甚至死亡。目前，我国人口老龄化速度居世界首位，老年人口已超过6543.8+0亿，迫切需要寻找有效的药物防治老年疾病。

中国传统医学历史悠久，疗效显著。它是中国传统文化的灿烂瑰宝。在几千年的实践和发展中，它形成了自己独特的理论体系。尤其对于疑难病和慢性病，中医有其独特性。中药具有多靶点、多效应的特点，既能改善症状缓解症状，又能提高机体抗病能力治愈疾病，副作用少，药源丰富。中医药在几千年治疗老年痴呆症和记忆力减退的临床经验中积累了许多宝贵的知识。自20世纪80年代以来，由于化学药物开发存在技术难度大、价格高、毒副作用明显、环境污染严重等现实问题，中药研究受到广泛关注。

地黄是一种常用的滋补中药，是玄参科植物地黄的新鲜根茎或干燥块根。最早见于《神农本草经》，被列为上品[5]。地黄在我国有1000多年的药用历史，应用广泛，对免疫、血液、内分泌、心脑血管、神经系统、抗菌消炎等有一定疗效。单味地黄[7]和以地黄为主的复方在治疗衰老及相关疾病方面的应用历史也很悠久。现代药理实验发现其主要活性成分为环烯醚萜苷类和地黄。

梓醇是地黄中含量最高的环烯醚萜苷，属于环氧醚类单萜。目前，我们实验室已经证明梓醇对细胞和动物具有神经保护作用，可能成为延缓衰老和治疗阿尔茨海默病、帕金森病等神经退行性疾病的潜在药物。由于衰老是各种神经退行性疾病的根本因素，因此研究梓醇的抗衰老作用对此类疾病的预防和治疗具有重要意义[8-9]。

实验前期发现梓醇可以改善D-半乳糖诱导的衰老小鼠的记忆丧失，同时改善脑组织的抗氧化能力和能量代谢障碍。因此，本研究利用D-半乳糖诱导的神经元衰老模型，进一步研究了梓醇的抗衰老机制，为该药物的研发和临床应用奠定了一定的基础。

研究意义:

关于1和D-半乳糖诱导衰老神经细胞模型的报道很少。阐明该模型的作用机制有助于抗衰老药物的筛选和机理研究。

2.梓醇对衰老动物模型有明显作用，细胞模型的研究有助于阐明梓醇抗衰老作用的分子机制。

研究内容:

采用小鼠脑神经元原代培养，用D-半乳糖体外诱导神经元衰老，研究梓醇对神经元的影响，测定细胞形态学观察、细胞活力和凋亡等综合指标。

在实验过程中，利用免疫组织化学染色和荧光染色技术、流式细胞仪、荧光显微镜、紫外分光光度计和荧光酶标仪，研究了梓醇在体外的神经保护机制。

预期成果和水平:梓醇对D-半乳糖诱导的小鼠脑神经元衰老有保护作用。

因此，本研究采用原代培养的SD大鼠皮层神经元，从超微结构、细胞周期分析、SA-β-半乳糖苷酶化学染色等方面观察D-半乳糖培养对神经元的拟衰老反应，并从生化方面研究梓醇的抗衰老作用。

研究的重点和难点:

1.掌握原代神经元细胞培养和免疫组化的实验技术。

2.阐明D-半乳糖诱导神经元衰老的浓度和时间范围。

3.初步探讨D-半乳糖诱导神经元衰老的机制。

4.阐明梓醇对D-半乳糖诱导的衰老神经元的影响。