核酸可以用电泳分离吗?为什么?

①四种核苷酸的电泳分离应使用pH3.5的缓冲溶液。在这个pH值下,这四种单核苷酸之间的负电荷差别很大,都向正极移动,只是移动速度不同,顺序为:UMP & gtGMP & gtAMP & gtCMP

(2)应采用pH8.0,可使核苷酸带更多负电荷,便于在阴离子交换树脂柱上吸附。虽然核苷酸在pH 11.4时负电荷较多,但过高的pH不利于分离。

③不考虑树脂的非极性吸附时,根据核苷酸负电荷数确定洗脱速度,洗脱顺序为CMP >;AMP & gtGMP & gtUMP,但实际上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在非极性吸附,嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。由于静电吸附和非极性吸附的相互作用,洗脱顺序为CMP >:AMP & gt;UMP & gtGMP .