植物组织培养
植物组织培养,即植物无菌培养技术,是基于植物细胞具有全能性的理论,利用根、茎、叶、茎尖、花、果实等离体器官,、组织(如形成层、表皮、皮层、髓细胞、胚乳等。)或细胞(如大孢子、小孢子、体细胞等。)和原生质体在无菌和适宜的人工培养基中培养,光照、温度等。
补充:
植物组织培养:
广义上也叫体外培养,是指分离组织、器官或细胞、原生质体等的技术。并通过无菌操作在人工控制下培养它们,以获得再生的完整植株或生产其它具有经济价值的产品。
狭义的组织培养是指从植物的不同部位再生植株,如形成层、薄壁组织、叶肉和胚乳。也指在培养过程中培养各个器官的愈伤组织,愈伤组织再分化形成再生植株。
植物组织培养步骤
第一步是把收集的植物材料不用的部分去掉,把需要的部分仔细洗干净,比如用合适的刷子刷。把材料切成合适的大小,也就是把人放在灭菌容器里是合适的。放一个水龙头,让水流动几分钟到几个小时。洗涤时间取决于材料的清洁度。易浮或细的材料可放入纱布袋中洗涤。污染严重时,流水冲洗特别有用。洗的时候可以加入洗衣粉清洗一下,然后用自来水冲洗洗衣粉。洗衣粉可以去除轻微附着在植物表面的污垢,去除脂类物质,便于与消毒液直接接触。当然,最理想的清洁物质是表面活性物质——吐温。
第二步是浸泡和消毒材料的表面。要在洁净工作台或接种箱中完成,准备好消毒烧杯、玻璃棒、70%酒精、消毒剂、无菌水、手表等。70%酒精浸泡10 ~ 30秒。因为酒精能使植物材料表面湿润,70%的酒精穿透力强,也容易杀死植物细胞,所以浸润时间不宜过长。还有一些特殊的材料,如果、芽、有苞和苞的孕穗期、有多层鳞片的休眠芽等。,而且主要用内部材料,可以用70%的酒精处理的时间稍微长一点。在无菌条件下,处理过的材料会在酒精挥发后被剥离,内部材料会被使用。
第三步,用消毒剂处理。表面消毒剂种类很多,可根据情况选择1-2种。参见表。第四步,用无菌水冲洗,每次3分钟左右,根据使用的消毒剂种类,冲洗3-10次左右。无菌水的洗涤作用是避免消毒剂杀死植物细胞的副作用。注意:①酒精渗透性强,幼材在酒精中容易失绿,浸泡时间要短,防止酒精杀死植物细胞。②成熟的材料,尤其是种子,可以长期浸泡在酒精中,比如种子可以浸泡5分钟。(3)氯化汞的渗透力较弱,一般浸泡约10分钟,对植物材料伤害不大。(4)漂白粉易导致植物材料失绿,幼材慎用。⑤在消毒剂中加入浓度为0.08-0.12%的吐温20或80(一种湿润剂),可以降低植物材料的表面张力,达到更好的消毒效果。