生化检验中血样采集和处理的知识
临床化学检验血液标本是指为完成一项或多项临床化学检验项目而采集的一定量的血液,包括抗凝和非抗凝。
第二,血液样本的采用
(一)取零件
1.静脉采血:最广泛使用的采血方法。常用的静脉有肘前静脉和腕背静脉,颈静脉和前囟静脉有时用于儿童和新生儿。
2.动脉采血:主要用于血气分析。常见的动脉有股动脉、肱动脉、桡动脉和脐动脉。
3.毛细血管采血:适用于只需要微量血液的实验或婴儿。常见的部位是耳垂和指尖,有时是儿童的大脚趾和脚跟。采血针刺入皮肤的深度应为2mm。2.5mm),血液局部应无炎症、水肿等。
(2)标本类型
临床化学检验血样分为血清、血浆和全血。临床常用的血清和血浆,除了前者不含纤维蛋白原外,大部分化学成分没有区别。只有当红细胞成分与血浆成分相似时,才使用全血;全血用于血气分析和血红蛋白电泳,但不用于一般临床化学分析。
3.全血被视为血清或血浆。
应尽早采集血样,以便将血清(血浆)与接触血细胞的全血自然分离。一般应在采血后2小时内分离血清或血浆。全血处理分为离心前、离心中、离心后三个阶段,每个阶段都有具体要求。
(1)预离心阶段
即在收集和离心分离索引书之前的一段时间。
1.血清:一般要让标本在离心前自行凝集,不能用木棒剥离血块。通常,血样在室温(22 ~ 25℃)下放置30 ~ 60 min可完全自发凝集;冷藏标本凝集反应缓慢;加入促凝剂会加速凝集(标本采集后,应轻轻倒置搅拌5 ~ 10次,以保证促凝剂的作用)。
2.血浆:需要血浆样本时,必须使用含有抗凝剂的血样采集管,采血后必须立即将采血管轻轻反转混合5 ~ 10次(保证抗凝剂发挥作用)。血浆可在5 ~ 10分钟后分离。
3.样本冷藏:样本冷藏可抑制细胞代谢,稳定一些温度依赖性成分,但全血样本一般不能冷藏;用于测定血钾的样本冷藏时间不应超过2小时。血液中儿茶酚胺、pH/血气、氨、乳酸、丙酮酸、胃泌素、甲状腺激素的检测需要冰冻样本。
当标本需要冷藏时(2 ~ 8℃),标本取后应立即放入冰块或冰水混合物中(不允许大冰块),标本必须与制冷剂充分接触,以保证制冷剂达到标本的高度。
4.代谢抑制剂和防腐剂:一些添加剂可以抑制细胞代谢,防止血液样本保存时分析物浓度的变化。测量血糖时,如果在血液中加入氟化钠,葡萄糖在22 ~ 25℃可稳定24小时,在2 ~ 8℃可稳定48小时而不分离血细胞。然而,由于新生儿和儿童的红细胞压积高,用氟化钠很难控制细胞的糖酵解。甲醛-草酸钾抗凝血防腐剂不适用于血糖测定;氟化钠-百里酚混合物不适合酶法测定,因为它能抑制酶的活性。
5.标本采集地点:(1)标本采集后应尽快送至实验室,尤其是采集区温度超过22℃时;(2)血样采集后,必须塞住血管,管口向上垂直放置,以减少管内内容物的振动,促进完全凝固,防止样品蒸发、污染和飞溅。(3)采集的血液样本应轻柔处理,防止因样本管摆动而引起溶血;溶血会影响测定结果。影响严重(增加成绩)的项目有:乳酸脱氢酶、血清天冬氨酸转氨酶、血清钾、血红蛋白;引起显著影响的项目有:血清铁(?),血清丙氨酸氨基转移酶(?)和血清甲状腺素(?);轻度影响(增加)的有:总蛋白、白蛋白、血清磷、血清镁、血清钙、酸性磷酸酶;(4)应避免将光敏分析物暴露于人造光或阳光(紫外线)下。比如VA,VB6,?-测定胡萝卜素、卟啉、胆红素等时。,标本管应用铝箔或类似物质包裹保护。
6.标本运送:全血样本应尽快从采血点运送到实验室。如果运输距离较长,特别是因为分析物的稳定性受到影响,可以在采血点分离血清或血浆,必要时再送往实验室;应注意包装、温度要求、处理方法等。运输过程中样品的稳定性,以确保分析组分的稳定性;在运输过程中,样本管应保持密闭并垂直向上放置。
7.实验室标本验收和离心准备:(1)保存标本验收记录(检查时要认真核对清单,认真记录相关信息,标本验收和处理要签字登记);(2)接受的标本应分类并准备离心;(3)实验室接受标本后,仍应保持标本管密封,管口朝上,垂直放置。拔下塞子后,血液中CO2的流失会导致pH值升高,离子钙和酸性磷酸酶降低,尤其是pH值的变化会影响一些检测结果的准确性。(4)标本的凝集时间应充足;含有抗凝剂的血样可以立即离心;有凝血剂的标本最早可在采血后5 ~ 15 min离心;抗凝全血样本(测定锌、锂、原卟啉等时。)可能不会离心;(5)冷藏(2 ~ 8℃)标本应在此温度下保存,直至准备离心。建议使用温控离心机;(6)离心前,不建议用小木棒或类似设备剥离附着在试管壁和塞子上的凝块。人工剥皮会诱发溶血。如果需要露出试管壁或者拔掉塞子,一定要非常注意,动作一定要轻柔。
(2)离心阶段
也就是说,指示剂已经在离心机中放置了一段时间。
1.离心时间和相对离心力(RCF):临床化学分析中血样离心时,RCF (1000 ~ 1200)?g,离心时间为5 ~ 65438±00min。
2.温控离心:离心过程中产生的热量不利于分析物的稳定,血液样本离心进行临床化学分析时必须使用温控离心机。一些温度依赖性分析物(如促肾上腺皮质激素、环腺苷酸、儿茶酚胺等。)应在4℃分离;对于没有特殊温度要求的分析物,离心温度应设置在20℃~ 22℃;温度低于65438±05℃可人为增加血钾测定值;冷藏运输的样品必须在要求的温度下进行离心。
3.再次离心:标本最好离心一次,如果需要再次离心,离上次离心的时间间隔应该很短;含有分离物质的血样不得再次离心。
(3)离心后阶段
指离心后,取出一定量的检测用血清或血浆前的一段时间。
1.应在采血后尽快(2小时内)完成血清或血浆与血细胞和血凝块的分离。
2.分离的血清或血浆的储存:实验室的室温以及血清或血浆的储存温度和时间是分析物稳定性和测定结果准确性的重要参数。(1)血清或血浆在22℃ ~ 25℃下贮存不应超过8h;(2)如果实验不能在8小时内完成,血清或血浆应保存在2℃~ 8℃;(3)不能在48h内完成的实验项目,或分离出的血清或血浆需保存48h以上的,应在-20℃下保存;(4)标本不宜反复冻融(仅一次),不宜保存在无霜冰箱中(可能引起标本温度变化);(5)离心后凝胶(凝胶屏障)上的血清可保存2 ~ 5天(也有报道4℃可保存24小时),但必须保证凝胶的完整性;然而,当使用非凝胶分离物质时,必须在离心后立即除去血清或血浆。(6)血清或血浆必须保存在密闭的试管中。
四、血清或血浆分离物质
指从全血中分离出血清或血浆的物质,包括凝胶物质和非凝胶物质。
(1)凝胶物质
是一种具有特定粘度和比重(血清或血浆与凝块之间的比重)的惰性凝胶物质,作为(1000 ~ 1100)?G RCF离心10分钟可在血清或血浆与凝块之间形成不可渗透的凝胶屏障,从而将血清或血浆与其接触的血细胞和凝块分离。
(2)非凝胶物质
它由珠子、圆盘、过滤器、纤维塞和其他惰性物质(玻璃、塑料、纤维、毛毡等)组成。).用比重介于血清或血浆与凝块之间的,轻轻加入血管中,用(1000 ~ 1100)?当RCF g离心10分钟时,它可以通过血液移动到血清或血浆与血细胞和凝块之间,形成界面,从而可以分离血清或血浆。
(3)完整的凝胶管系统
该系统由真空采血管(硅化塑料管)组成,其中含有惰性凝胶物质、促凝剂或抗凝剂。注意产品必须有相应的性能证明和有效期,且必须在其有效期内正确使用。