一个实验者为了找到腺嘌呤营养缺陷型蓝藻菌株，用紫外线诱变蓝藻？请简要描述他应该如何设计这个实验。

1 .株

大肠杆菌)K12SF+ 02sf+

2.培养基

1) LB液体培养基:10 mL/瓶*4。

2) 2倍磅液体培养基:3毫升/管*2

3) LB固体培养基:250 mL/瓶*1。

4)基本固体培养基:300 mL/瓶*1。

5)无氮基础液体培养基:5 mL/瓶*1。

6) 2N基本液体培养基:5ml/管*1。

混合氨基酸和维生素

氨基酸分为7组，其中6组每组6种氨基酸，每种氨基酸均研磨均匀，充分混合(如果使用的氨基酸是dl型，需要加倍用量)。

Ⅰ

依靠

精炼的

甲基硫化物

半胱氨酸

嘌呤

胱氨酸

Ⅱ

组

精炼的

苏州的简称/江苏省的简称/苏联的简称/一个姓氏

种类

文竹

嘧啶

Ⅲ

十天干的第三/第三

甲基硫化物

苏州的简称/江苏省的简称/苏联的简称/一个姓氏

羟基储备乳

甜食

丝绸

Ⅳ

光

半胱氨酸

种类

羟基储备乳

不同亮度

提花丝织物

Ⅴ

苯基丙基

胱氨酸

文竹

甜食

不同亮度

奶酪

Ⅵ

颜色

嘌呤

嘧啶

丝绸

提花丝织物

奶酪

Ⅶ

风干肉

Ⅷ

混合维生素(B1、B2、B6、泛酸、对氨基苯甲酸、烟酸和生物素等量研磨并充分混合)。

1.菌液的制备:将大肠杆菌K12接种于含10mlLB培养基的三角瓶中，37℃培养过夜。接种10mlLB培养基的0.3ml三角瓶在37℃培养5小时。分装在2个5ml离心管中，8000转/分，3次；弃去上清液，加入2ml生理盐水，混匀，制成4ml菌悬液。

2.紫外线诱变:将3ml菌悬液倒入小培养皿(7cm)中，将培养皿置于紫外线灯下，连同盖子一起灭菌65438±0min，然后打开盖子照射3-4min。加入3ml 2LB培养基，然后在黑箱中培养12小时以上。

3.青霉素灭活野生型:取3ml菌液，8000r/min离心3分钟，收集细菌。加入4ml生理盐水，离心三次，制成3ml菌液。取0.1毫升，加入无氮基本培养基(5毫升)，37℃培养1.2小时以上。然后加入5ml 2N基础培养基和适量青霉素钠盐，37℃培养。

4.缺陷的检测和培养:将0.1毫升的12、16和24小时培养物包被(LB，一种基本培养基)并在37℃培养36-48小时。选择在完全培养基上菌落数大大超过基本培养基上菌落数的那一组，用无菌牙签跳下生长在完全培养基上的200个菌落，分别点在基本培养基平板和完全培养基平板上，直至该线基本完整。37oC文化。

5.重认证:选择LB培养基上但基本没有的菌落，在基本培养基上做标记进行重认证，保留在完全培养基上备用。那些过了24小时还不长的就是次品。

6.鉴定:待检缺陷型在10mlLB中嫁接，37℃培养12-16小时。以8000转/分钟离心3分钟收集细菌，然后用4毫升生理盐水离心洗涤。制成4毫升细菌悬液。将1ml倒入一个基础平板中，将平板底部分成9格，用接种环依次放入氨基酸和维生素，1格作为对照，不加任何营养物质，37℃培养2小时。

可能比较复杂。对不起，我已经尽力了

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