梅毒论文和文件
这两种测试的原理列举如下,仅供参考:
1,梅毒试剂卡的原理:
专有技术
梅毒抗体检测试剂是利用双抗原夹心法原理,以胶体金为指示剂制备的。
向测试卡的样品孔中加入一滴待测血清和两滴缓冲溶液。如果血清中含有一定量的Syp-Ab,就会与金标中的Syp-Ag结合形成复合物。当层析到达T线时,复合物与嵌入T线的梅毒重组抗原免疫结合,从而使桥连胶体金在T线上显色。当剩余的金标记继续层析到C线时,金标记和嵌入此处的多克隆抗体被免疫结合以桥接胶体金并显色。如果血清不含Syp-Ab或少于一定量,T线的疟疾重组抗原不会与金标反应,C线的多克隆抗体仍会与金标结合,出现单一颜色。
结果解释
阳性:当T射线和C射线均为红色条带时,检测结果为阳性;
阴性:T射线不着色,C射线用红带着色时为阴性;
无效:C线不着色,表示测试失败或失败。
2、类风湿因子试剂的原理:
类风湿因子(RF)存在于类风湿性关节炎(RA)患者的血清中。是一种以变性IgG为靶抗原的自身抗体,主要存在于类风湿性关节炎患者的血清和关节液中。是一种抗变性IgG的抗体,属于IgM型。它可以与IgGFc片段结合。在RA患者和大约50%的健康人中存在产生RF的B细胞克隆。在变性IgG(或与抗原结合的IgG)或EB病毒的直接作用下,可大量合成RF。健康人产生RF的细胞克隆很少,单核细胞分泌的可溶性因子能抑制RF的产生,一般很难检测到。RF主要是IgM自身抗体,但也有IgG、IgA、IgD和IgE。各种射频的临床意义不同。IgG、IgA、IgM样RF的测定通常采用间接ELISA法,即用热凝集兔IgG包被反应板微孔,加入样品,再分别加入抗人IgG、IgA、IgM酶标抗体,使反应会与底物显色。为了防止各种Ig类别的RF相互干扰,酶标抗体使用标记的抗体F(ab)2片段。
原则
变性IgG包被在聚苯乙烯乳胶粒上。当这种致敏的乳胶遇到待测血清中的RF时,会发生肉眼凝集,称为乳胶凝集试验。
在包被有热凝集变性IgG的聚苯乙烯反应板微孔中,加入待测血清,若有RF存在,则相互结合,然后加入酶标热凝集变性IgG与之反应,加入底物后即可显色。根据显色的程度,可以判断RF的存在和水平。这是双抗原夹心ELISA。
乳胶凝集试验
RF是一种主要存在于类风湿性关节炎患者体内的抗人变性IgG抗体,可与IgG的Fc段结合。变性IgG包被在聚苯乙烯乳胶粒上,当致敏的乳胶遇到待测血清中的RF,肉眼即可凝集。
操作
在1和56℃下灭活30分钟(灭活C1q以防止假阳性凝集)。将待测血清用0.1 mol/L甘氨酸缓冲盐水(pH 8.2)稀释成1: 20(将0.05ml血清加入1ml生理盐水中)。
2.取1滴(约0.05ml)此稀释血清,将1滴乳胶RF试剂加入到黑色方形玻璃的正方形中,立即摇动反应板3分钟使其充分混合,然后在直视下观察。每次试验都设置了阳性和阴性对照。
参考价值
正常人1: 20稀释血清为阴性。
结果判断
乳胶凝集试验正常者多数为阴性,3分钟内有明显凝集者为阳性。阳性反应标本应稀释两次,以确定血清的滴度。根据显色程度,ELISA可与阳性和阴性对照进行比较,作出阳性或阴性判断。
3.类风湿因子对梅毒抗体检测的影响分析,有兴趣的可以看一下这个文档。附截图。