求一篇题为《鲜奶抗生素残留检测》的论文
样品经80℃灭菌后,加入嗜热链球菌。经过一段时间的培养,嗜热链球菌开始增殖。此时,加入人代谢底物2,3,5三苯基四唑一氯化物(TTC)。如果样品中不含抗生素或抗生素浓度低于检测限,嗜热链球菌会继续增殖,将TTC还原成红色物质。相反,如果样品中含有高于检测限的抑菌剂,嗜热链球菌被抑制,因此指示剂TTC不降低,保持原来的颜色。
2.嗜热脂肪芽孢杆菌抑制方法
培养基预先加入嗜热脂肪芽孢杆菌孢子,并含有pH指示剂(邻甲酚紫)。加入人体样本并孵育后,如果样本中不含抗生素或抗生素浓度低于检测限,细菌孢子会在培养基中生长并利用糖产生酸,pH指示剂的紫色会变黄。相反,如果样品中含有高于检测限的抗生素,细菌孢子不会生长,pH指示剂的颜色不变,仍然是紫色。
3、链球菌湿热抑制法测定方法
在白色背景前观察,当试管中的样本是牛奶的原色时,说明牛奶中有抗生素,这是阳性结果。试管中样本的红色为阴性。如果最后观察还是可疑,建议重新检测。
4、嗜热脂肪芽孢杆菌抑制判断方法
在白色背景之前,从侧面和底部观察小试管中培养基的颜色。保持培养基原来的紫色为阳性结果,将培养基变成黄色或黄绿色为阴性结果,介于两者之间的颜色为可疑结果。可疑结果应在最终观察前培养30分钟。如果培养基的颜色仍在黄色和紫色之间,说明抗生素浓度已接近该方法的最低检出限,建议此时再次检测。
5,4%二氯化三苯基四唑(TTC)水溶液
原料
2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC) 1g
无菌蒸馏水5mL
准备
称取TTC,溶于灭菌蒸馏水中,置于棕色瓶中,保存于2℃-5℃。如果溶液变成半透明的白色或浅棕色,就不能再用了。使用时,用无菌蒸馏水稀释5倍,成为4%的水溶液。
6、青霉素G参考溶液
原料
青霉素g钾盐30.0毫克
适量无菌磷酸盐缓冲液
适量不含抗生素的脱脂牛奶
方法准确称取标准青霉素G钾盐,溶于无菌磷酸盐缓冲液中,使其浓度为100 iu/ml ~ 1000 iu/ml。然后,用无菌无抗生素脱脂乳将溶液稀释至0.006IU/mL,分装在无菌小试管中,密封备用。在-20℃下储存不超过6个月。