【阅读文献】【2022 NewPhytol-CLE1-7调节芽再生】
首次发布:2022年6月01
通讯作者:陕西师范大学王国栋。
发现在芽再生阶段,CLE1-CLE7可被强烈诱导表达,而WUS的表达被CLV1和BAM1抑制,从而调控芽再生。
在系统发育树上,cle1-CLE7在一个分支上,与之前的报道一致。CLE的花期早于过量表达CLE1-7的花期。
并且CLE1-CLE7过表达的表现型与clv3过表达的表现型一致,与wus突变的表现型相似,CLE1、4、6、7的过表达可以完全互补CLV3,表明CLE1-7可能以功能冗余的方式参与CLV3-CLV1-WU。
敲除CLE1-CLE7基因,cle1-cle7的SAM无表型,clv3有重度表型。进一步得到8个进程,发现clv3cle1-7和clv3没有区别。
Cle1-cle7单过程对芽再生影响不大,说明其功能冗余;在7-process cle1-7sep和8-process clv3cle1-7oct中,外植体表现出相当大的再生潜力,远高于WT和clv3外植体。
CLE1-7编码四种不同的CLE成熟肽?10nM接近生理浓度,显示的治疗浓度为5uM或10uM。
外源应用的抑制作用:CLE5p和CLE6p较弱,CLE2p在nM水平较强,剩余的CLE1/3/4/7p在nM水平有用但不明显,在uM水平明显。
自身启动子可以驱动CLE4和CLE7的前体表达,也可以抑制芽再生。
结果表明,外源施用和内源表达CLE1-7有助于芽的再生,但不影响愈伤组织的形成。
也就是说,CLE过表达抑制芽再生,并在敲除后促进芽再生。
根据pCLE:GUS的表达谱,除5外,CLE1-7在CIM中被强烈诱导和表达。
从CIM转移到SIM后,pCLE4:GUS和pCLE7:GUS逐渐被限制在突出的位置。
描述:时空表达对应于芽再生过程。
CLV1在CIM中不存在,仅在SIM中SAM形成的突起中有表达(之前有报道)。PBAM1:GFP显示BAM1在CIM和SIM中强烈广泛表达。
用CLE1-7处理拟南芥,观察主根长度实验。
当施用CLE1-7时,在bam 1-4 clv1-101突变体中出现短根,但在CLV 1-1突变体中变得不敏感。是因为BAM1是主根抑制的主要受体,即BAM的缺失使根感受到的CLE1-7的抑制较少吗?
此外,还表明CLE1-7对根长的抑制依赖于BAM1。
再看,可疑受体是否有助于芽再生,是否有表现型:
Bam1-3、单突、clv1-101单突和BAM 1-4 CLV 1双突均表现出较强的芽再生能力。此外,将CLE1-7应用于突变体,其中CLE不能抑制芽再生,表明CLV1和BAM1参与了CLE1-7介导的芽再生。BAM2和BAM3不起作用。
通过应用CLEp观察到pWUS:GUS的表达,并且WUS在cle1-7中的转录水平被QRT增加。
通过这两个实验,推测CLE1-7可能通过限制下游WUS的表达来调控芽再生。