枯草芽孢杆菌的镜检及生理生化反应
首先,我建议你直接和导师沟通这些问题。我想他会给你一个明确的答案,对你的研究思路会很有帮助。
以下是根据我个人理解给出的回答或建议:
一、镜检的目的应该是让你熟悉枯草芽孢杆菌的个体形态和孢子特征,这是进一步菌株分类和状态鉴定的需要。
二、生理生化实验的目的同上,应该主要是鉴定菌种的分类地位,或者让你熟悉菌种鉴定的流程。也不排除需要研究这一菌株的具体功能。
3.菌落形态是菌株鉴定的重要依据,但不是充分必要条件。如果严格鉴定菌株的分类地位,需要采用多重分类,从多个角度分析菌株,运用各种原理不同的方法和技术进行综合判断。有三个一般步骤:
1.形态鉴定:个体形态、群体形态、革兰氏染色、基本结构、特殊结构等。
2.分子鉴定:提取纯菌DNA样本,扩增16SrDNA并测序。测序结果在NCBI网站上公布,初步确定了该属的一级分类单元。
3.理化分析:碳氮源利用、产酶特性、代谢产物等鉴定特征。应根据前两次分析的结果并结合伯杰的《系统细菌学手册》进行检验。一般需要检测至少20项理化指标,很多可以达到100以上。一般可以鉴定到“种”的一级分类单元
如果以上三步仍不能确定菌株的分类地位,则需要进一步分析,如DNA杂交、化学成分分析等。,如果需要,可以确定整个序列。
4.常用于细菌鉴定的生理生化包括淀粉水解试验、糖发酵试验、甲基红(MR)试验、vp试验、明胶液化试验、硫化氢产生试验等。建议参考伯杰的《系统细菌学手册》或董秀珠主编的《常见细菌系统鉴定手册》。另外,对于一般的教学或验证性实验,可以查阅《普通微生物学实验手册》。